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HSP-90,小鼠熱休克蛋白-90酶聯(lián)免疫試劑盒

HSP-90,小鼠熱休克蛋白-90酶聯(lián)免疫試劑盒

簡要描述:HSP-90,小鼠熱休克蛋白-90酶聯(lián)免疫試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠熱休克蛋白-90(HSP-90)的含量。

產(chǎn)品型號:

所屬分類:小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒

更新時間:2022-08-30

詳細說明:

HSP-90,小鼠熱休克蛋白-90酶聯(lián)免疫試劑盒

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠熱休克蛋白-90(HSP-90)的含量。

l 有效期:6個月

l 保存條件:2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠熱休克蛋白-90(HSP-90)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠熱休克蛋白-90(HSP-90)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

HSP-90,小鼠熱休克蛋白-90酶聯(lián)免疫試劑盒的類型
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。

當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結(jié)合。標本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標抗體愈少,因此陽性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有干擾物質(zhì),直接包被不易成功,可采用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,然后加入抗原,形成固相抗原。洗滌除去抗原中的
雜質(zhì),然后再加標本和酶標抗體進行競爭結(jié)合反應(yīng)。競爭法測抗體有多種模式,可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結(jié)合,抗HBc   ELISA一般采用此法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結(jié)合,洗滌后再加入酶標抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)。抗HBe的檢測一般采用此法。

洗板方法

1.  手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

2.  自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

計算

  以標準物的濃度為縱坐標(對數(shù)坐標),OD值為橫坐標(對數(shù)坐標),在對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。



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