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酶標(biāo)法和分光光度法的區(qū)別

更新時(shí)間:2022-06-29 點(diǎn)擊量:2675

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酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀,又稱微孔板檢測器,是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器。


酶標(biāo)儀的原理:

光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本,該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上。光電檢測器將透射過待測標(biāo)本后強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號,電信號經(jīng)前置放大、對數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等處理后,送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的濃度,zui后由顯示器和打印機(jī)輸出結(jié)果。


酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)都是實(shí)驗(yàn)室常用的分析測量工具,它們的測定原理是相同的,都是使用朗伯-比耳定律,測定的都是樣本的吸光度。 但同時(shí)二者之間也存在一些不同之處,具體差別體現(xiàn)在:


1)盛裝待測溶液的容器:  分光光度計(jì)用的是比色皿,酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板(酶標(biāo)板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,每個(gè)比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,因此用它作為固相載體,酶標(biāo)板通常為48孔或96孔,每個(gè)微孔可以盛裝不同的溶液。


2)光路的方向和長度:  分光光度計(jì)是水平光路,而酶標(biāo)儀則是垂直光路。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。垂直光的特點(diǎn)是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路, 所以光路的長度應(yīng)該是液體液面的高度。所以測得的值受到樣品的體積的影響。


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