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牛血清的質量要求

更新時間:2015-12-18 點擊量:1305

    隨著科學技術的發展和生活水平的不斷提高對生物醫藥產品的質量要求也越來越高,所以對制備工藝中所涉及到的各種原材料的質量標準要求也越來越高,特別是對用于細胞培養基中的主要天然成份――牛血清的質量要求也不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。
    對牛血清的質量要求:Gibco 和Sigma二家主要的美國牛血清供應商的牛血清都已進入到我國市場,他們對其質量標準要求都極為嚴格,從血清來源到產品質量都有明確規定。

    1) 血清來源:可從世界各國收集胎牛血清,但是必須符合他的質量標準和美國農業部進口要求。地方當局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說明血清質量的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗結果和交付情況。

    2)血清的收集:胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個月內)血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業生產的標準:低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。

    3)血清的制備:
    a. 超低IgG胎牛血清:通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量減到zui低,一般IgG≤5ug/ml,生物學活性不變。

    b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過氧化酶方法測定)。

    c. γ-射線照射:已經證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。而且這個劑量的γ-射線照射不會改變血清的理化性質和對細胞培養的影響。

    4)除菌過濾:經過上述處理的粗制血清再經過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要通過三層0.1微米濾膜,其他血清可通過0.2微米濾膜。

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