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你更偏好于哪一種酶聯免疫檢測方式呢?

更新時間:2014-10-14 點擊量:1210

    現如今,酶聯免疫檢測方式有多種,您可以根據自己的偏好來選擇。我公司的科研檢測試劑盒產品一批上市了,如有購買需要可及時同我們銷售人員取得,您的信任就是我們不斷進取的zui大動力。
·雙抗體夾心法
 1. 將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。
 2. 加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
 3. 加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
 4. 加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
    
·雙位點一步法
    在一步法測定中,應注意鉤狀效應,類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成夾心復合物,所得結果將低于實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。
   
·間接法測抗體 
  1.將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。
  2.加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由于不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。
  3.加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。
  4.加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
    本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。
    
·競爭法  
  1.將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。
  2.待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。上海恒遠生物說明,如受檢標本中含有抗原,則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合,競爭性地占去了酶標抗原與固相載體結合的機會,使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原,保溫后,酶標抗原與固相抗體的結合可達zui充分的量。洗滌。
  3.加底物顯色:參考管中由于結合的酶標抗原zui多,故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。
    
·捕獲法 
  1.將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。
  2.加入稀釋的血清標本:保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。
  3.加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。
  4.加入針對特異性的酶標抗體:使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。
  5.加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應。

    以上方法中您zui偏好哪一種呢?一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶,而反應體系中添加有相應的底物。ELISA的結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。

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